123 CNCD - Foro Academias - Células Madre de Origen Dental

0:14 inteligencia dental el líder indiscutible y absoluto en educación dental a distancia en idioma Castellano le da la más cordial bienvenida a esta conferencia grabada gracias a nuestros patrocinadores oficiales le ofrecemos siempre un amplio abanico de temas útiles y de actualidad entregados con alta calidad por excelentes conferencistas es un placer recibirle en

1:00 nuestras conferencias webex en vivo por internet con sesión de preguntas y respuestas o en nuestras conferencias grabadas disponibles en nuestro canal de YouTube sus sugerencias y comentarios son Bienvenidos en promo @elena disponible www.intel.com que disfrute esta conferencia a nombre del Colegio Nacional de cirujanos dentistas les damos la más cordial bienvenida a este

1:47 ciclo de conferencias que forman parte de un foro de academias donde Esperamos contar con su presencia estas conferencias están pensadas para poder llegar a todas las áreas de la práctica odontológica ustedes tienen en sus consultorios queremos invitarlos a ser parte del Colegio Nacional de cirujanos dentistas acérquense vean la oferta académica que tenemos que es muy interesante y muy amplia en cada una de nuestras filiales les comentamos que el Colegio Nacional de cirujanos dentistas obtuvo la idoneidad de la dirección general de profesiones para la certificaciones profesionales con el oficio 039 el cual nos permite ofrecer a ustedes este examen de

2:32 certificación y la recertificación para cada uno de ustedes que sean mantenido actualizados Durante los últimos años tenemos una oferta muy amplia para todos ustedes Esperamos contar con su presencia en las instalaciones del colegio nacional deanos dentistas que siempre Estará abierto para recibir a todo profesionista que quiere hacer una práctica segura y de calidad para sus pacientes Muchas gracias

3:28 he Laura Muchísimas gracias eh es un placer estar Compartiendo con ustedes Muchísimas gracias al Colegio Nacional de cirujanos dentistas Y muchísimas gracias a imasd inteligencia dental y en especial a Héctor por este magnífico trabajo que desarrolla la transmisión de esta conferencia voy a presentar en esta ocasión el tema de las células madre que realmente deben ser nombradas o denominadas como células

4:14 troncales de origen dental estas células troncales de origen dental son células que se mantienen indiferenciadas en la cámara pulpar en el tejido mesenquimatoso o mesodérmico de la pulpa dental parte de ese tejido que durante el desarrollo eh del diente no se ha diferenciado eh Y que tiene el potencial de diferenciarse posteriormente eh lo que ustedes ven en pantalla es eh los símbolos de dos eh instituciones uno es eh inevoc inevoc es innovaciones y desarrollo en en biotecnología celular somos un banco y somos un laboratorio eh

5:03 el laboratorio de investigación es inde bioc y es ahí donde hemos desarrollado ya hace 7 años toda la tecnología necesaria y toda la ciencia básica necesaria para poder aislar de la pulpa dental cultivar en cámaras de cultivo y criopreservar las células dentales no diferenciadas Qué quiere decir las células troncales o células madre que en un futuro tendrán cierta eh eh función en el organismo o fuera de ella porque estas células pueden ser manejadas en el

5:49 laboratorio para diferenciarlas a varios tipos de linajes celulares eh el el la definición de células madre o de células troncales es una célula indiferenciada que se mantiene como tal así durante el desarrollo embriológico y durante el desarrollo odontogénico y que tiene dos características principales una prima característica es que tiene la capacidad de autorenovarse Qué quiere decir esta

6:37 capacidad de autorrenovarse que tiene la capacidad de sufrir o de tener múltiples divisiones dando lugar en ocasiones a dos células indiferenciadas nuevamente esto quiere decir a dos células que no tienen aún función y que son dos células más de eh el el órgano la zona el tejido eh que se está eh replicando Y que en ocasiones tiene una división que produce una célula indiferenciada y una célula con ciertas funciones o ya diferenciada eh todos estos estudios que hemos realizado

7:24 durante 7 años no es posible realizarlos de manera individual tenemos alianzas estratégicas y la lanza más importante es con el instituto de investigaciones biomédicas de la UNAM en especial con el laboratorio de investigación del dror carlén gazarian el doctor gazarian es un biólogo embriólogo eh que ha dedicado una gran parte de su vida al estudio de las células troncales y quien es el líder científico y el jefe científico del laboratorio inde vioc para el desarrollo de todos estos estudios hablábamos de la definición entonces una célula troncal es aquella que tiene uno la capacidad de autorreplicarse o de autorrenovarse y segundo la capacidad de

8:11 diferenciarse invitro es decir en el laboratorio e en vivo es decir en un organismo eh en diferentes linajes celulares a esto se le llama potencialidad de diferenciación o idad de las células para diferenciarse a uno o a varios tipos de célula con funciones ya bien definidas pero para que realmente sean consideradas como células troncales dentro de la ciencia básica requieren de ser positivas a ciertos marcadores celulares específicos qué es esto de ciertos marcadores celulares Ya lo vamos a ver ahorita más adelante desde el punto de vista clínico Qué significa las

8:59 células troncales Bueno desde el punto de vista clínico son células que no están especializadas y que están en el cuerpo humano y que son capaces posteriormente de diferenciarse en células especializadas y que van a tener funciones específicas es decir en la cámara pulpar en ligamento periodontal en el periápice vamos a tener células de origen mesenquimatoso y ectodérmico que no están diferenciadas y que bajo ciertos estímulos en el organismo o en el laboratorio van a diferenciarse a tipos de célula que nosotros mismos podemos inducir todo

9:47 este trabajo lo llevamos a cabo en dos partes uno en el laboratorio del doctor gazarian el instituto de investigaciones biomédicas y el otro en el laboratorio de indoc el laboratorio de inevoc funciona como un banco también un banco de criopreservación este banco de criopreservación trabaja como ustedes pueden ver en las diapositivas bajo los regímenes más estrictos de Asepsia y antisepsia y con aire de flujo laminar y bajo esta campana de flujo laminar que es donde entran las muestras después de haber sido activado todo un proceso de luz ultravioleta que deja el aire estéril y libre de partículas

10:33 contaminantes una vez en esta cámara de flujo laminar se abre se fractura o se corta el esmalte y el cemento de la unión amelocementaria del diente y se expone se expone la cámara pulpar para aislar la pulpa Este es un ejemplo de una cámara pulpar con parte de la pulpa del de las de las raíces de un un premolar de un premolar extraído por motivos ortodónticos entonces aquí Tenemos uno de los primeros puntos principales que consideran las células de origen dental como con cierta ventaja con respecto a otras células troncales A

11:19 qué otras células troncales a las células troncales de origen embrionario eh que desde el punto de vista ético desde el punto de vista legal desde el punto de vista religioso están sometidas a mucha discusión y en muchas zonas o en muchas partes del mundo no está permitido su uso ni siquiera en investigación por qué porque tienen que provenir de las etapas iniciales del desarrollo embrionario lo cual significa eh obtener el embrión a través de de un aborto eh los dientes y la pulpa de los dientes la podemos obtener de Tres formas a través de la exfoliación de los dientes

12:04 temporales a través de la extracción programada de estos dientes temporales o a través de cualquiera de las indicaciones en odontología y en cirugía para extraer terceros molares dientes supernumerarios o como el ejemplo que muestro de dientes premolares indicados por razones Una vez que se obtiene la cámara pulpar o que se obtiene la pulpa el tejido pulpar dentro de esa cámara de flujo laminar en condiciones estériles la pulpa se corta literalmente con un bisturí a Pequeños en pequeños fragmentos Y estos fragmentos se meten en este tubo de ensayo especial con

12:50 ciertas enzimas básicamente colagenasa y dispasa que van a romper las puentes o las uniones de entre la célula y y su matriz que es en este caso la colágena y permiten que al romper la unión de la colágena y las células las células se aíslen como tales Este es el primer paso en el proceso de obtención de estas células eh una vez obtenidas el número de células necesarias posterior a que han eh eh hecho sus funciones la colagenasa y la dispasa Entonces se obtiene un número de células la cual es llevada a la cámara de cultivo Cómo se llevan

13:36 estas células a la cámara de cultivo se llevan en lo que ustedes conocen como cajas de petri nada más son otros tipos de cajas son como unas botellas especiales en donde el biólogo como ustedes están viendo una vez que pudo aislar las células y estas células tienen la característica de adherirse al plástico quita el el sobrenadante del líquido eh resultante de la acción de la colagenasa y la dispasa las células mesenquimales quedan adheridas al plástico y estas son consideradas entonces células mesenquimales de origen dental que van a ser sometidas a esta cámara de cultivo la cual las va a tener en condiciones como Si estuvieran en el

14:23 cuerpo humano a una temperatura de 37 grc con Una atmósfera rica en oxígeno y con un 5% de CO2 como Si estuvieran sometidas a las condiciones normales de el cuerpo humano esto Qué permite esto permite Lo que normalmente sucede en el organismo sucede por las vías normales de diferenciación celular de crecimiento celular de eh e metabolismo celular y que terminan con la producción de células nuevas células nuevas que en este caso están formándose o están desarrollándose dentro de esta cámara

15:09 dentro de esta cámara de cultivo en las condiciones ya especificadas cada tercer día el biólogo puede abrir la cámara y sacar cada una de estas botellas en donde están desarrollándose las células para observarlas al microscopio y una vez que pasados TR días observa un buen número de células puede tomar una muestra de estas células para que nosotros en el laboratorio Busquemos que estas células uno se encuentren se encuentren libres de ciertos virus y bacterias que pudieran contaminar a otras células que están cultivándose o que van a ser criopreservados dos que se

15:54 sometan análisis genéticos que nos permitan Tener información de que estas células que estamos cultivando y que posteriormente vamos a criopreservar estén este genéticamente estables de modo que puedan tener una reproducción digámoslo así sana para que se obtengan de la célula madre o de la célula troncal hijas de células indiferenciadas sanas genéticamente y que eh A partir de esta reproducción o esta multiplicación obtengamos millones de células indiferenciadas y todos estos estudios se hacen dentro del laboratorio una vez que comprobamos que las que las

16:41 células y el cultivo está libre de patógenos diversos patógenos y que están sanas desde el punto de vista genético Entonces se vuelven a meter a la cámara de cultivo una vez que crecieron como ustedes van a verlo y que se reprodujeron a millones si entonces las células son criopreservados de criopreservación no es que yo le ponga hielos a mi Cuba del viernes ni le ponga hielos a mi refresco de la mañana etcétera sino que tenemos que ir descendiendo la temperatura gradualmente el aparato que ustedes ven en pantalla se llama el cryomed y este es un aparato que nos permite llevar a

17:27 las células a un un centígrado eh menos cada minuto de forma que lleguemos a una temperatura aproximada de -80 gr Para que posteriormente puedan ser llevadas a ser crio preservadas en tanques de nitrógeno a -10 gr c y conservarse como tal Vean este proceso ustedes están viendo del lado izquierdo de su pantalla un punto negro en la primera imagen en donde se puede observar que ese es uno de los fragmentos que observábamos de la cámara pulpar este fragmento de cámara pulpar

18:13 si está bajo las condiciones adecuadas si las células están bajo los medios adecuados de crecimiento y las células están sanas desde el punto de vista genético a los 3 días van a ha desarrollado esta imagen que ustedes ven en medio Es decir de este poco número de células que encontramos del lado izquierdo empiezan a multiplicarse como células indiferenciadas con estas características fusiformes y que a los 21 días aproximadamente y en general casi todas las muestras las células tapizan totalmente la caja de crecimiento o la botella de crecimiento

18:59 y vean que de haber obtenido este pequeño número de células al tercer día al día 21 tenemos completamente poblada de eh de densidad importante de número de células estas células están ahora expandidas y están listas para llevarse al proceso de criopreservación una vez que están analizadas genéticamente microbiológicamente contadas para lograr las cantidades necesarias para la criopreservación inevoc lo que hace es pasar estor cel eh estas muestras es decir en el mismo laboratorio se adquiere un número de certificado del número de muestra para ser metido a las

19:47 cámaras de criopreservación o a los tanques de creo preservación en cuatro viales cada uno de los viales contiene aproximadamente un millón y medio de células indiferenci con características de células mesenquimales que previamente fueron analizadas y marcadas con estos marcadores típicos de membrana de la membrana celular de forma que en storacell y en biog no guardamos un solo Vial o un solo tubito con un número determinado de células guardamos cuatro viales de células o cuatro tubos de células que eh los ponemos en diferentes tanques

20:32 como medida de seguridad y de protección de todas estas células y al paciente y al médico o al odontólogo que refirió al paciente para que guardara sus células se les envía Eh ya sea por correo o ya sea vía internet este estado Este primer estado de la reproducción de su célul en donde ustedes pueden ver que se está haciendo mención a que se recibe la muestra con el color característico del medio de transporte de inde vioc cuando este medio de transporte cambia de ese color rosado que ustedes pueden ver y se torna color naranja o se torna rojo

21:18 intenso o se torna verde quiere decir que tiene una contaminación ya sea por virus por hongos o por bacterias una vez que se ha dado ese informe a los TR días que se observa el crecimiento Entonces se puede decirle al paciente y al odontólogo referidores que ya se adhirieron al plástico y esto quiere decir que a los 3 días está habiendo una adecuada autorreplicación de esas células obtenidas de la cámara pulpal y finalmente terminamos haciéndole toda esta esta gráfica Y mostrándole cómo fueron creciendo estas células del día 1

22:04 al día 3 o día 7 hasta el día 21 aproximadamente donde ya tenemos el número adecuado para guardar cuatro viales en criopreservación y este es el reporte final en donde se le dice al paciente se le informa al paciente y al odontólogo En dónde quedó preservado en cada uno de los tanques con un número de serie etcétera para tener siempre el control de estas células que están creo preservadas qué es lo que guardamos guardamos estas celulas que ustedes ven esta célula enorme que es una célula troncal sí es una célula de origen mesenquimal Qué quiere decir de origen

22:49 mesodérmico y que está dando lugar a múltiples células hijas desde el punto de vista clínico qué es lo que yo quisiera lograr que esta célula indiferenciada enorme que ustedes están observando me formara millones de células ya diferenciadas que yo puedo inducir en el laboratorio o en el mismo organismo su diferenciación a ciertas líneas como en este caso observamos la diferenciación hacia células osteoblásticas células product de matriz ósea colágena tipo un como lo ven ahí ven las células adheridas a su membrana

23:36 basal que ellas mismas están produciendo y que posteriormente por vía de otros procesos eh biológicos mineralizar para formar el hueso inmaduro y posteriormente el hueso maduro Qué es este este proceso que desde el punto de vista eh biológico desde el punto de vista eh ciencia básica Qué significa todo esto de autorrenovación no significa nada más que echarnos para atrás en el desarrollo eh más primario de la unión del espermatozoide con el óvulo que es lo que conocemos como desarrollo embriológico y como ustedes ven en la

24:24 diapositiva Qué es el desarrollo embriológico pudiera rebir resumirlo como si estuviéramos hablando de una cascada de reacciones iniciada por la conjunción de un espermatozoide viable con un óvulo sí que va a dar lugar a un fenómeno del desarrollo dependiente de tres factores o de tres procesos biológicos uno expresión de genes que contienen estas mismas células dos mecanismos receptores de señalización todas las señalizaciones entre célula y célula célula y matriz célula y membrana de otra matriz células

25:12 e integrinas y diferentes moléculas se lleva a cabo a través de señalizaciones proteicas qué hacen estas señalizaciones proteicas estas señalizaciones proteicas hacen o generan una activación de los receptores de la membrana que penetran con ciertas señales dentro de la membrana hacia el interior de la célula y en el interior de la célula va a ha una serie de proteínas que van a ser las funciones de traductores de estas información de esta señalización Y entonces la señal que viene de afuera de célula a célula o de matriz a célula o

25:57 de proteína a célula se interpreta dentro de la célula Y finalmente va a generar la diferenciación de estas células troncales o estas células madres que pueden ser pluri o multipotenciales en los diferentes tipos celulares que van a formar los tejidos los órganos y los diferentes sistemas corporales si ustedes recuerdan en todos nuestros libros viejos del ham de histología nuestros maestros que nos hablaban de la membrana celular todos nos decían que la membrana celular está constituida por una capa bilip que está Cruzada por una serie de proteínas por qué estas proteínas estas

26:44 proteínas ponen en contacto el exterior de la célula con el interior de la célula y una activación de estas carbonos terminales si ustedes recuerdan recuerdan las proteínas están constituidas por una serie de aminoácidos y tienen en un lado su carbono terminal y por el otro lado su nitrógeno terminal que son muy activos químicamente este carbono terminal por fuera de la célula o en la membrana exterior de la célula va a recibir la señalización o la activación de cierto grupo de proteínas que si uno pone marcadores específicos o

27:32 anticuerpos específicos para estos receptores de membrana se van a generar lo que se llama no cirujanos dentistas como ustedes Ven aquí sino clusters of differentiation Qué quiere decir clusters of differentiation grupos de diferenciación de células que van a ir encaminadas todas a tener esos mismos receptores en la membrana Una vez que se han activado estos receptores de la membrana por ciertas señalizaciones proteicas van a transmitir ese impulso hacia el interior de las células donde se van a activar otros grupos proteicos para estimular reacciones que incluyen división celular

28:20 como mitosis aumentada movimiento celular para desplazamiento de lugares diferentes del organismos hacia otros y diferenciación de las células como apoptosis que es la muerte celular programada muy importante para el control de las células y que estas células no tengan la posibilidad de malignizar para ser consideradas células mesenquimales Esta es una muestra de un grupo grande de células realizada en inevoc en donde ustedes ven ahí cd105 CD 73 cd34 etcétera En donde podemos observar que las muestras son positivas o

29:06 negativas a estos clusters of differentiation o de diferenciación de hacia diferentes linajes celulares para considerar a estas células de la pulpa dentar aisladas y cultivadas a millones de células células mesenquimales tienen que ser positivas a estos marcadores cd44 cd105 cd90 CD eh 73 y tienen que dar lugar a diferentes linajes celulares básicamente de tejido conectivo o tejido conjuntivo como son principalmente adipositos osteoblastos condroblastos

29:51 células neurales células musculares y algunos algunos tipos de células de tipo endotelial Cómo es que funciona esa señal de fuera hacia dentro ustedes ven ahí una un factor de señalización como puede ser el transforming growth factor que activa la parte externa del receptor intracelular a través de fosforilaciones porque todas las funciones en la célula y el organismo se llevan a cabo a través de fosforilaciones es esta activación celular por fuera de la membrana activa otro grupo de proteínas que pasan al interior del núcleo y en el interior del

30:38 núcleo se unen con cierto grupo de proteínas que van a ser la transcripción del mensaje desde fuera de la célula hacia el interior Cuál es el resultado de esta transcripción o esta traducción del mensaje es la activación de ciertos genes que van a decirle a la célula te vas a diferenciar en mioblasto en célula pancreática en cardiomiocito etcétera de forma que hubo dos grandes avances en la ciencia que permitieron trabajar con estas células uno es la el conocimiento y el aislamiento de las células embrionarias y el conocimiento

31:24 de que estas células eran pluripotenciales Qué quiere decir pluripotenciales que tenían todos los genes necesarios para formar cualquier tejido que provenía de las tres capas del del embrión del ectodermo del mesodermo o del endodermo y cómo se activan estos genes el doctor Craig benter quien vino aquí a México al Instituto Mexicano de medicina genómica es el que secuenció el genoma humano y regaló este conocimiento al público en general al mundo y puso al servicio de la investigación científica el desarrollo eh que él hizo de la

32:10 secuenciación del genoma humano y a través del conocimiento de dónde se encontraba cada uno de los genes necesarios para diferenciar las células es que sabiendo que estas células en embrionarias o progenitoras adultas tienen y contienen estos genes en determinada localización pueden activarse estos genes y dirigir la diferenciación de las células hacia las células que un que uno quiere de modo que si recordamos una teoría vieja desde 1963 que sería la teoría de Jack monod eh que habla de la eh eh

32:58 regulación de la sobrerregulación o de la desregulación de las de de ciertos genes eh esta teoría del operón de Jack y monod no tiene como fin más que hacernos sa ver que hay genes que operan constantemente en el organismo que pueden activar o que pueden inactivar cierto grupo de genes y al activar o activar cierto grupo de genes pueden hacer que esas células se mantengan como indiferenciadas se diferencien a ciertos linajes como puede ser hematopoyético o mesenquimal o tengan ciertas actividades

33:44 de eh celulares Como pudiera ser ya mencionábamos el movimiento celular o la apoptosis todos estos genes en la actualidad se saben en qué cromosomas se encuentran y pueden ser activados o desactivados Y es de esta forma que pueden presentarse varios síndromes y ahora se sabe en qué localización cromosómica se encuentran estos genes que pueden ser alterados o pueden activarse o tratar de desactivarse durante el desarrollo embrionario como de manera de investigación o bajo ciertas influencias de uso de factores de crecimiento durante el crecimiento y desarrollo de

34:31 un ser humano para tratar de contrarrestar las alteraciones clínicas que un eh síndrome puede generar como en el caso que estamos viendo el síndrome de moebius de forma que si ustedes recuerdan brevemente el desarrollo embriológico el desarrollo embriológico antes de que el embrión forme eh lo que es su trofoblasto y su embrioblasto el trofoblasto dará origen a la placenta y el embrioblasto al embrión sí es una eh bicapa o es un eh disco bilaminar exclusivamente y yo quisiera que ahorita

35:17 pensaran en el desarrollo od de los dientes en en la odontogénesis y que simular o que compararan este desarrollo este desarrollo embriológico con el desarrollo de un diente eh inicialmente el diente se desarrolla a partir de la lámina dental en donde se ponen en contacto dos estructuras eh odontogénicas una es el ectodermo por arriba y por abajo Lo que se llama la condensación del mesénquima o el mesodermo que formará la papila dental si ustedes observan el embrión se

36:03 desarrolla a partir de la actividad de estas dos capas embrionarias el ectodermo y el endodermo y es el es el ectodermo el que manda una señal proteica como de las que hablábamos para decirle al endodermo diferénciate en cierto linaje celular que forme una tercera capa que va a dar lugar al disco trilaminar o al disco embrionario con tres capas el ectodermo el mesodermo y el endodermo Y entonces sí permitir que se desarrolle basado en ciertas vías de señalización

36:48 como una vía muy primaria que es la vía notch que va a formar todo el proceso de blástula de asula y posteriormente el desarrollo o la división celular infinita para formar todos los tejidos provenientes del ectodermo todos los tejidos provenientes del mesodermo y todos los tejidos provenientes del endodermo piensen entonces en el desarrollo del diente en el desarrollo del diente es el ectodermo que emite una señal hacia el mesodermo en desarrollo en la lámina dental y esta señal

37:34 proteica le dice a las células del mesodermo que están indiferenciadas como las células indiferenciadas que nosotros tenemos congeladas transfórmate o diferénciate a qué a odontoblastos y produce dentina y una vez que estas células del mesodermo han sido diferenciadas a odontoblastos estas células del mesodermo diferenciadas regresan una señal al ectodermo que cubre la parte superior de la lámina dental y esta señal que envía el mesodermo o las células diferenciadas del mesodermo hacen que las células del ectodermo se diferencien en lo que son los ameloblastos que van a dar lugar al

38:21 esmalte de forma que ese proceso del desarrollo odontológico y el desarrollo de todos los procesos de del primer arco y segundo arco branquial de donde se desarrollan los dientes se desarrollan a partir de células del mesodermo Y a partir de células de la cresta neural Ese es el potencial importantísimo que tienen y que guardan como vía de señalización las células que provienen de la pulpa dental guardan procesos de señalización tan antiguos en su desarrollo como pueden ser la vía notch y guardan un conjunto de procesos

39:08 biológicos que se desarrollan interacciones ectomesenquima cosas que dan lugar a múltiples procesos de diferenciación durante el desarrollo embriológico durante el desarrollo dental y durante el desarrollo de la vida adulta es por eso que podemos obtener de la cámara pulpar o de la pulpa dental estas células que están indiferenciadas que provienen de la cresta de la cresta neural que es una estructura embriológicamente muy ancestral y que guarda vías de señalización también muy antiguas pero muy potentes en su capacidad de diferenciación celular Esta esta este potencial de diferenciación a diferentes

39:54 líneas celular celulares los guarda esta célula mesenquimal que podemos conservar de la cámara pulpal y quiero que piensen en esto rápidamente eh yo no sé si todos ustedes estén enterados que en el 2012 estos dos doctores el Dr John gourdon de Inglaterra y el Dr sinji yamanaka de Japón y que trabaja en San Francisco ganaron el el premio Nobel de fisiología y de medicina en el 2012 esto quiere decir el año pasado sí y ganaron el premio Nobel de fisiología celular y de Medicina porque hicieron en vez de una

40:41 diferenciación celular una desdiferenciación celular hicieron lo que ellos conocen o dieron a conocer como célula la inducción de células pluripotenciales a qué se refiere este Premio Nobel A qué se refiere esta inducción de células pluripotenciales a que células diferenciadas con funciones ya bien establecidas Como pudiera ser un osteoblasto un odontoblasto un cardiomiocito una neurona eh cualquier célula diferenciada con una función establecida en el organismo en vez de diferenciarse más se

41:28 retrocediera y se indiferenci ara Cuál es el objeto de esta indiferenciación el objeto de esta indiferenciación es que se obtienen células entre comillas embrionarias sin haberse obtenido del embrión esto lo ganan en el 2012 el doctor Carl jefe científico de inde bioc en el 2006 inicia a trabajar con las células de El tejido pulpar con las células mesodermal del tejido pulpar inicia esas ese trabajo de desdiferenciación el doctor gazarian es experto en señalización no solo de célula a célula

42:15 sino es experto en señalización intracelular conoce los genes que hay que activar dentro de una célula para diferenciarla pero también sospechaba que se podían utilizar ciertos genes para desdiferenciado de diferenciación mesenquimatoso de la pulpa dental ya las pudo desdiferenciado y obtuvo células pluripotenciales inducidas Qué quiere decir esto que estas células pluripotenciales tienen la capacidad de formar células de cualquiera de las tres capas

43:00 embrionarias llámese ectodermo llámese mesodermo o llámese endodermo lo cual tiene un una capacidad un potencial una plasticidad inagotable para producir cualquier célula del organismo humano estos dientes entonces que día a día se van a la basura en todas las clí en todas las universidades en todos los hospitales en todos los consultorios dentales sí tienen una cantidad extraordinaria de células mesodérmicas y células ectodérmicas que tienen la capacidad de autorenovarse

43:47 indefinidamente y tienen la capacidad o potencial de diferenciarse a no solo células de estirpe de tejido conectivo como hablábamos sino que ya ha sido probado por nuestro laboratorio y por muchos otros laboratorios en el mundo que estas células pueden diferenciarse a diferentes tipos de células como vamos a ver más adelante de forma que un diente en etapa de folículo dental tiene una cantidad mucho mayor de células embriológicamente eh con el potencial de autorrenovación y de diferenciación pero los dientes adultos los dientes ya

44:33 formados los dientes temporales los terceros molares hasta los dientes supernumerarios todos contienen diferentes áreas con capacidad de almacenar células troncales o células madre indiferenciadas estas células madre o células troncales al inicio cuando gronos de la Universidad de adelaide en Australia publicó el primer artículo que daba a conocer estas células mesenquimales indiferenciadas de la pulpa dental se supo posteriormente que existían también células ectodérmicas y que no solamente estaban presentes en la pulpa dental o en la cámara pulpar sino

45:19 que están presentes en el periápice en los vasos sanguíneos de la cámara pulpar o de el los conductos pulpares en el ligamento periodontal importantemente y desde luego en el folículo dental de forma que cualquier diente Sea temporal o sea permanente tiene la capacidad de darnos o aislar o tenemos la capacidad de aislar células troncales de origen mesodérmico y origen ectodérmico esta esta gráfica que usted están viendo eh nos habla de todas las vías de señalización proteica que se llevan a

46:05 cabo desde la fase de lámina dental hasta la fase de morfogénesis de la corona del diente y desarrollo de todas sus estructuras histológicas y su corona y su raíz y quiero que vean no es imposible aprendernos todas estas vías Pero todas estas vías que estoy señalando aquí abajo tienen que ver con el desarrollo primario de ese mesénquima que queda rodeado en la fase de casquete dental durante la odontogénesis que queda rodeado por esas células ectodérmicas y recuerden son estas células ectodérmicas las que mandan una señal al mesénquima condensado de mesodermo y que le dicen a este

46:53 mesodermo transfórmate en células odontoblástica produce dentinas y regrésame una señal proteica que permita a mí ectodermo indiferenciado diferenciar células indiferenciadas a células ameloblástico ahí la formación o la producción de esmalte y la producción de dentina que dejan encapsulado una parte de ese mesodermo que va a formar la pulpa y va a formar el ligamento dental el ligamento periodontal y que va a formar todas las células que van a generar posteriormente todos estos nichos de células eh No

47:40 diferenciadas o de células troncales desde luego que el niño tiene mucho mayor potencial de formación de número de células y de células de estirpe diferente que el adulto sin embargo quiero decirles que en indeb hemos aislado células de pacientes hasta de 64 años células genéticamente estables y células que se replicaron hasta millones sí vean Esta es una muestra la muestra a a los 24 horas la muestra a los 7 días la muestra a las otra la muestra B a las 24 horas y la muestra a los 7 días todo

48:27 esto el biólogo que está controlando el proceso lo puede observar al microscopio y puede saber si estas células están creciendo de manera normal y puede saber si en algún momento del desarrollo o de la multiplicación celular las células antes de su creo preservación en los tanques de nitrógeno a -196 grc pudieran contaminar o pudieran haber sido afectadas por algún otro proceso que no es el normal Durante este desarrollo una vez que sabemos que están genéticamente estables que no hay contaminación y que obtuvimos los millones de células

49:13 indiferenciadas adecuados entonces crío preservamos mucha gente nos pregunta para qué sirven estas células para qué van a ser utilizadas desde el punto de vista vista clínico las células mesenquimales son células que han sido utilizadas ya en tratamientos clínicos las células mesenquimales dentales Fueron descritas por gronos en el año 2000 las células de estirpe mesenquimal obtenidas de la médula ósea que fueron las primeras descritas fueron descritas en los años 60 por frieden y posteriormente ladas y dadas a conocer

50:00 con clusters of differentiation Es decir identificadas desde el punto de vista de de de capacidad de diferenciación por Klan y entonces estas células de la médula les llevan años de conocimiento científico a las células idénticas mesenquimales de la pulpa Dental por lo que en la dualidad la mayoría de los tratamientos para los cuales son usadas las células troncales mesenquimal mesenquimales provienen de la médula ósea esto no quiere decir que las células mesenquimales obtenidas de los dientes las cuales tienen una capacidad

50:46 mucho mayor de autorrenovación de formar células en millones que la célula proveniente de la médula ósea Y esto es importante mencionarlo porque esa capacidad de autorrenovación nos permite obtener las células en millones después de una o dos replicaciones les llamamos pases en el laboratorio después de que la célula se ha replicado una o dos veces y que no es necesario como a la célula mesenquimal obtenida de la médula ósea de replicarla 5 10 15 hasta 50 veces cada replicación de la célula tiene el riesgo

51:33 de generar alteraciones en algo que se llaman los telómeros de la célula los telómeros de la célula o de los cromosomas de la célula son las estructuras que impiden que el dna se divida indefinidamente sí estos telómeros generan la terminación de la replicación del dna y controlan que la célula no sufra mutaciones Mientras más replicaciones en el laboratorio de las células Mientras más replicaciones de las células en el cuerpo humano mayor tendencia a sufrir alteraciones de inestabilidad genética y

52:18 Por ende formación de tumores o tendencia a la malignidad eso es el tesoro de las células dentales con una o dos replicaciones con uno o dos pases se obtienen los números de células necesarios para criopreservar números que desde el punto de vista clínico serán importantes en en el futuro qué tratamientos van a ser aplicados qué tratamientos pueden ser aplicados los tratamientos hay que considerar que siempre estén considerados dentro de un protocolo científico que esté avalado por un comité de ética y por un comité científico y que tenga

53:04 un beneficio para la población mundial en un inicio aquellas enfermedades que aún no tienen ningún tratamiento por ejemplo esclerosis múltiple esclerosis lateral daño Irreversible por lesión o sección de la médula espinal eh de hígado cánceres de páncreas no quiere decir que esta célula tenga la posibilidad de curar el páncreas ni tenga la posibilidad de curar el cáncer de hígado no estoy hablando de ese tipo de curaciones mágicas que desgraciadamente son tan anunciadas en páginas del internet o incluso en la televisión no existe ese tipo de

53:51 curación mágica Hay que ser realistas y hay que avanzar con el rigor de la ciencia básica y llevando el conocimiento de esta ciencia básica a protocolos clínicos con clínicos expertos que nos permitan conjuntar o lograr ese vínculo entre científicos y clínicos para que la medicina avance En beneficio de los pacientes estas células dentales ya han sido utilizadas para la regeneración ósea que tanto hacemos los cirujanos dentistas los implantólogo los periodoncistas los cirujanos maxilofaciales y ya han sido publicadas en revistas fíjense esta revista de

54:37 stemcell esta revista nace eh de una revista que se llama inicialmente stem cells de los años 60 70 y posteriormente Nace una revista hija que quiere eh que se llama stem cells translational medicine que no quiere decir otra cosa más que trasladar el conocimiento científico de las stem cells a la cama del paciente al beneficio del paciente a los tratamientos establecidos bajo protocolos científicos y éticos Cuál es el potencial de diferenciación de estas células obtenidas de la pulpa dental fíjense ustedes toda esta lista de que se pueden

55:24 diferenciar sin ninguna duda a odontoblastos porque para eso fueron generadas a cementoblastos a osteoblastos a células de ligamento periodontal a hueso alveolar que tiene sus características histológicas y metabólicas a condroblasto de eh meniscos de ligamentos ad Dipo blastos a neuronas qué es lo que más hay en la cámara pulpal nervios por lo tanto estas células indiferenciadas de la pulpa dental tienen un poder exquisito para diferenciarse a diversos tipos de neuronas neuronas motoras neuronas

56:10 sensitivas y lo que se conoce como glía o soporte de esa glía de esas neuronas y sensitivas o motoras se pueden diferenciar a cardiomiocitos se pueden diferenciar a una fracción que se llama cd34 positiva que es la fracción vascular Qué quiere decir esto células que tienen la capacidad de regenerar la vascularidad o de producir en cierta forma o de inducir la angiogénesis la formación de vasos sanguíneos o circulación células Beta del pancreas células Beta del páncreas que como ustedes saben son células que producen

56:56 insulina células hepáticas mioblastos pueden regenerar córnea y desde luego expresan marcadores de células ectodérmicas como los ameloblastos pero también pueden trabajar desde el punto de vista clínico como células indiferenciadas mesenquimales y para eso se usan para regeneración vascular y para regeneración epidérmica de piel por ejemplo en quemados y para lo más importante desde desde el punto de vista clínico A mi parecer es su actividad inmunomoduladora o inmunosupresora como células mesenquimales no diferenciadas estas son

57:42 células de ligamento periodontal que están expresando la fracción cd34 o angiogénicos particularidad obtenidas de un ligamento periodontal de un tercer molar ex traído por razones odontológicas y vean estas pulpas dentales individuales proveen suficiente tejido para la selección de células cd34 sí es decir no son pocas las células de esta fracción vascularizan o angiogénicos dentales y de los ligamentos dentales cuál es esa actividad inmunomoduladora ante toda esta locura de esquema que ven en el centro puede ustedes observar la célula mesenquimal es decir

58:31 esta célula que yo estoy señalando puede ser la célula obtenida de la cámara pulpar o de la pulpa dental de un paciente y que no se fijen en todo lo demás solo acuérdense que las células dendríticas que provienen de los monocitos son las células que agarran un antígeno en una reacción eno anticuerpo llámese alérgica llámese inmunológica y esta célula dendrítica que une al antígeno a través de lo que se llama el hla del human leucocyte antigen y de el complejo mayor de histocompatibilidad

59:17 presentan este antígeno a los a los linfocitos y ustedes saben que los linfocitos t y los linfocitos c b Perdón montan la respuesta inmunológica y esta respuesta inmunológica hace por ejemplo que se rechacen los órganos transplantados que los pacientes transplantados de riñón de corazón de pulmón de hígado tengan que recibir medicamentos inmunosupresores de por vida y que pongan en riesgo su vida por infecciones llámese eh virales Como la gripa No necesariamente tiene que ser un hiv ni

1:00:02 una hepatitis c eh infecciones odontogénicas son pacientes que son eh que no son inmunocompetentes y que por lo tanto tienen que Vivir de manera muy especial en vez de recibir esos cuatro o cinco inmuno supresores se están haciendo protocolos Ya en la actualidad de la utilización de células eh mesenquimales eh Y eh eh administradas por vía intravenosa o administradas por vía eh intratecal o administradas a través de transplantes de médula o como si fueran transplantes de médula y estas células eh

1:00:51 inmunomodulación de la eh presentación de la célula del antígeno mismo que sería la célula del órgano transplantado al Linfocito T que va va a generar la respuesta inmunológica Esa es la función inmunomoduladora que tienen estas células Y fíjense lean conmigo esta diapositiva de manera rápida diabetes tipo 1 Cuál es la diabetes tipo 1 la diabetes insulinodependiente la diabetes juvenil los anticuerpos contra las células bet pancreáticas es decir las células que producen la insulina se desarrollan a través de células presentadoras de

1:01:37 antígenos como son macrófagos y células dendríticas que son los primeros en infiltrar las islas bet pancreáticas las células que están produciendo la insulina seguidas de los linfocitos cd4 y cd8 células natural healers y linfocitos B varios estudios indican que la interleucina 12 secretada por los macrófagos pueden activar estos linfocitos la interleucina 2 y las citoquinas proinflamatorias liberadas por los linfocitos aumentan la activación de los otros linfocitos cd8 citotóxicos Quienes son los causantes de la muerte celular vía la activación de la apoptosis Qué están haciendo este

1:02:24 grupo de células están liberando sustancias como citoquinas que están matando a las células bet pancreáticas que producen la insulina y que producen la diabetes tipo 1 esta actividad de inmuno actividad de estas células está siendo controlada en protocoles en protocolos clínicos ya actuales a través de células del uso de células mesenquimales y Estos son todos unos artículos que hablan acerca de eso fíjense desde 1998 después en el 2011 y después en la prevención de la diabetes tipo 1 ya en

1:03:09 el 2012 pero también son utilizadas en aquellos pacientes que tienen falla hepática Crónica Quiénes son estos pacientes los pacientes con hepatitis c con hepatitis b con hepatitis e o con cirrosis hepática y se ha comprobado en tratamientos clínicos que estas células mesenquimales en Transfusión son seguras y mejoran la función hepática en los pacientes con hepatitis Crónica o con falla hepática Crónica estas células pueden ser las células mesenquimales que se hayan en el tejido pulpar de los dientes que desgraciadamente se van

1:03:55 muchos de ellos a la basura Sí hay protocolos ya bien establecidos e gronos en el 2004 en una revista clínica que es el lanset que es un muy buen journal de Medicina interna publica en este lanet el la eh eh la aparición o el descubrimiento de las células troncales de ligamento periodontal y estas células troncales de ligamento periodontal eh pueden formar cemento pueden formar Hueso arvolar y pueden formar el propio ligamento periodontal y expresan una proteína que se llama escleras is que es característica de todos los ligamentos eh del cuerpo humano es decir no hay

1:04:43 duda que la obtención de estas células de ligamento humano de dientes que están sanos periodontalmente o dientes que están desarrollando su mento como los parcialmente erupcionados terceros molares se pueden obtener todas estas células para la regeneración periodontal y vean estas células son un grupo de mesenquimales ya crecidas y yo quisiera que me dijeran A qué se parece esta imagen celular todos nuestros libros de histología nuestros libros de de de eh embriología nos dirían que este es un un cuerpo

1:05:28 somático y que estas son las prolongaciones dendríticas y que esto se trata de una neurona neurona que proviene de la célula mesenquimal obtenida de la pulpa dental de Muchos pacientes no lo hemos comprobado en un paciente lo hemos comprobado en Muchos pacientes y hemos podido medir la cantidad de neurotrofinas que producen es decir acetilcolina dopamina adrenalina todos los tipos de neurotransmisores que actúan a diferentes niveles todas estas células son capaces de bajo manipulación estrictamente controlada en

1:06:14 el laboratorio a diferenciarse a neuronas motoras o neuronas sensitivas y estas no son más que muestras de los marcajes con inmuno fluorescencia de los característicos antígenos para células neurales en sus fases iniciales y en sus fases de neurona ya madura eh vean esto Esta es otra obtención de una pulpa dental el nacimiento de varias células vean que si yo les enseñara millones de cortes de este tipo de células cuando se están ao replicando todas las células son fusiformes y todas las células si nos acercáramos a ver en

1:07:01 el microscopio se encuentran en conexión Unas con otras y se encuentran en conexión con sus membranas basales Por qué Porque el estímulo o el estímulo proteico que recibe la membrana de cada una de las células pasa de célula a célula de membrana a célula y de un tipo de de célula a otro tipo de célula es por eso que ustedes ven en acercamientos que estas células pueden siempre deben encontrarse unidas Unas con otras para transmitir la misma información que se está generando en base a las diversas

1:07:48 vías de señalización de diferenciación de apoptosis de crecimiento de muerte celular vean Estos son algunos estudios en donde ya El doctor gazarian ha usado estas células mesenquimales de la médula ósea no crecidas en millones eh en en en en trabajos clínicos ya en en México con resultados adecuados ya no tengo tiempo para hablar de todos estos resultados Solamente les digo que estas células han sido diferenciadas a a cardi en nuestro laboratorio y que no solamente funcionan como miocardiocitos O cardiomiocitos sino que son llevadas

1:08:35 ya en pacientes en algunos lugares del mundo en protocolos muy estrictos a las zonas infartadas como células mesenquimales y como células mesenquimales tienen la capacidad de producir una gran cantidad de sustancias tróficas que producen regeneración del tejido infartado o bien se produce la diferenciación in situ de la célula mesenquimal al cardiomiocito Cuál es el resultado de esto que el corazón no queda con una zona no funcional infartada queda con una zona regenerada por tejido cardiomiocito que tiene la capacidad de latir es decir el paciente no queda con

1:09:22 una arritmia que es lo que generalmente complica o mata a los pacientes con secuelas de infarto al miocardio y para terminar quiero que vean en el eh la diapositiva que están viendo es un grupo de células mesenquimales provenientes de una pulpa dental en donde ustedes pueden observar el latido latido que se que se presentó de forma espontánea cuando este grupo de células se unieron no tengo el otro V en donde se ve que a los pocos milisegundos de que empieza a latir este grupo de células empiezan a latir otro grupo de células mqu mesenquimales

1:10:09 obtenidas de la pulpa dental eh alrededor de este grupo es decir como si fuera el sintio cardíaco que está gobernado por el el el el las las de purkinge e en la conducción Electro fisiológica de el corazón Eh entonces eh vean que estas células tienen múltiples capacidades y Recordando el inicio de esta plática para resumir les digo entonces que son millones las células mesenquimales que pueden obtenerse de las pulpas dentales de los ligamentos dentalis dentales del periápice dental

1:10:58 de los dientes temporales de los dientes primarios de los folículos dentales y que estas células tienen tres características una capacidad de autorrenovación como casi ninguna célula adulta del organismo o progenitora del organismo segundo tienen todo ese potencial o plasticidad de diferenciación a lo que ya mencionamos células bet pancreáticas neuronas motoras sensitivas cardocitos célula hepática células óseas células de ligamento periodontal etcétera y que todas estas células han sido marcadas y han sido observadas como su

1:11:46 comportamiento mesenquimal que es característica la adherencia al plástico y los diferentes marcadores de de células mesenquimales que ya mencionamos espero que haya sido de su agrado espero que haya habido una aportación para el conocimiento y espero haber eh generado En aquellos odontólogos jóvenes y viejos también especialistas o no el deseo de estudiar esta célula el deseo de estudiar este este desarrollo de odontogénico del desarrollo embriológico de esta medicina regenerativa porque no sé por qué razón

1:12:32 los odontólogos siempre tenemos la idea de que tenemos coartado o coapt el eh e el intelecto y no tenemos la capacidad suficiente para desarrollar investigación creo firmemente que cualquier odontólogo tiene el coeficiente intelectual suficiente para desarrollar cualquier tipo de de investigación que se plantea y me gustaría terminar con algun idea una idea que siempre menciono en mis pláticas y que digo que el límite del conocimiento es la pasión y la pasión por la especialidad que uno tenga por la profesión que uno tenga no tiene límites cuando está basada en ese conocimiento

1:13:20 Muchísimas gracias Nuevamente gracias a Héctor gracias a Laura gracias al colegio Nacional de cirujanos dentistas y a y + d Muchas gracias foreign