Ringkasan Singkat
Video ini menjelaskan teknik isolasi bakteri dengan menggunakan metode street plate untuk mendapatkan kultur murni dari populasi campuran. Proses dimulai dari persiapan media kultur sampai dengan pengamatan hasil akhir setelah inkubasi.
- Teknik street plate untuk isolasi bakteri.
- Langkah-langkah dalam persiapan dan pengamatan kultur bakteri.
Persiapan Media Kultur
Langkah pertama adalah persiapan media kultur dengan mengambil berat media agar dan mencampurkannya dengan air distilasi sesuai petunjuk pada kemasan. Proses sterilisasi media dilakukan sesuai instruksi pabrik, beberapa hanya perlu direbus 100 derajat celcius, sedangkan yang lain perlu dikukus menggunakan autoclave pada suhu 121 derajat celcius selama 15 menit. Setelah media steril, tuangkan ke dalam cawan petri yang steril dan biarkan hingga mengeras.
Pengujian Inokulasi
Sebelum melanjutkan, bersihkan area kerja di dalam kabinet keselamatan biologis. Ambil kultur bakteri yang ingin diambil koloni murninya dan media agar yang telah disiapkan. Gunakan loop inokulasi yang sudah dibakar hingga merah panas dan pastikan membawa loop steril ke dalam kabinet secepatnya. Setelah mendinginkan loop, labeli cawan media baru dengan informasi detail seperti nama media, nama tes, dan tanggal.
Proses Streaking
Setelah mendapatkan loop yang sudah dingin, ambil satu loop penuh kultur bakteri dari piring kultur lalu buat smear di sudut piring media baru. Setelah itu, bakar kembali loop dan tunggu hingga dingin. Proses streaking dimulai dengan cara zigzag pada seperempat pertama piring, kemudian lanjutkan ke seperempat kedua dengan menyentuh garis streak sebelumnya. Ulangi cara ini untuk seperempat ketiga dan keempat tanpa membakar loop lagi.
Inkubasi dan Observasi Hasil
Setelah selesai melakukan streaking, tutup piring kultur dan balikkan untuk diinkubasi pada suhu 37 derajat celcius selama 24 jam. Setelah inkubasi, letakkan piring kultur yang baru pada penghitung koloni. Dari hasil pengamatan, terlihat bahwa kepadatan koloni lebih tinggi di seperempat pertama dan menurun ke seperempat keempat. Koloni bakteri yang terisolasi dapat diambil untuk mendapatkan kultur murni dengan memindahkannya ke piring kultur TSA yang baru.
