简要概述
本视频介绍了生物技术公司中常用的发酵和回收过程,重点介绍了绿色荧光蛋白(GFP)的回收过程。视频首先解释了发酵过程,包括细胞外和细胞内两种生产方式,然后详细介绍了GFP回收过程的步骤,包括离心分离、细胞破碎和过滤。
- 发酵过程是生物技术公司生产产品的关键步骤,包括细胞外和细胞内两种生产方式。
- GFP回收过程包括离心分离、细胞破碎和过滤等步骤,目的是从发酵液中分离出GFP。
发酵
视频首先介绍了发酵过程,它是生物技术公司生产产品的关键步骤。发酵过程利用微生物来生产有价值的化合物或产品。视频解释了两种发酵方式:细胞外生产和细胞内生产。细胞外生产是指微生物将目标产物分泌到培养基中,例如某些氨基酸、酶或单克隆抗体。细胞内生产是指目标产物被保留在细胞内,需要通过细胞破碎来释放。视频重点介绍了细胞内发酵,并指出发酵只是生产流程的第一步,接下来需要进行回收过程。
回收
视频详细介绍了GFP回收过程,该过程包括三个主要步骤:离心分离、细胞破碎和过滤。
离心分离
发酵完成后,发酵液被收集并送入回收环节。首先,利用离心机将E.coli宿主细胞从发酵液中分离出来。然后,将细胞悬浮在新的缓冲液中进行清洗,并再次进行离心分离。
细胞破碎
经过清洗的细胞被悬浮在新的缓冲液中,并通过高压均质机进行破碎。均质机将细胞通过一个微小的孔口,由于压力过大,细胞破裂并释放出细胞内容物,包括细胞质和GFP。为了确保所有E.coli细胞都被破碎,溶液需要经过均质机两次。
过滤
细胞破碎后,溶液再次通过离心机进行分离,这次目的是将细胞碎片从溶液中分离出来。分离后的液体被称为裂解液,其中包含GFP。最后,裂解液通过0.22微米过滤器进行过滤,去除残留的固体物质。过滤后的溶液被称为澄清裂解液,标志着回收过程的结束。
纯化
回收过程结束后,澄清裂解液被送入下一个环节:纯化。纯化过程旨在去除GFP溶液中的溶解杂质,并对GFP进行浓缩和稳定化。
总结
视频详细介绍了GFP回收过程的步骤和原理,并强调了每个步骤的重要性。视频还介绍了回收过程所需的设备和材料,以及操作流程和安全规范。